Aktuelle Trends der assistierten Reproduktion – Embryotransfer
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Lehr- und Forschungszentrum für Landwirtschaft Raumberg-Gumpenstein 6. Tierärztetagung 2014 27 – 34 ISBN: 978-3-902849-10-6 Aktuelle Trends der assistierten Reproduktion – Embryotransfer beim Rind Johann Wilhelm1* VORBEREITUNGͲ SPÜLUNGͲ ÜBERTRAGUNG Embryo Transfer: History • 1890: first ET with rabbits (HEAPE) • BreiterEinsatzderGenomanalyse • 1944: first ET with sheep (CASSIDA et al.) • LandwirtenutzenverstärktdenEmbryotransfer • 1952: first ET with pigs (KVASNICKII) • PraktischeTierärztegefordert: • SpezielldasEinsetzenvonEmbryonenaberauchdas VorbereitenfüreineSpülungsindeinwichtiges Betätigungsfeld. • DieSpülungselbstwerdenspezielleTeamsdurchführen. • 1964: first ET without surgery (MUTTER et al.) • 1968: beginning of embryo deep freezing Superovulation D e f i n i t i o n : vermehrte Eizellenreifung und – Freigabe nach Verabreichung von FSH B e g i n n : zwischen Zyklustag 8 bis Zyklustag 14 VIER TAGE 2mal täglich FSH in absteigender Dosierung verabreichen, am letzten Tag 2 mal Prostaglandin im. am übernächsten Tag 2 mal Besamen VORBEREITUNGSPLAN 1 Tierarztpraxis Anger, Fresen 90, A-8184 ANGER * Ansprechperson: Dr. Johann WILHELM, E-mail: [email protected] ET: frühembryonale Entwicklung Aktuelle Trends der assistierten Reproduktion - Embryotransfer beim Rind 28 InnereBetrachtung WachsenderFollikel FollikelvorderOvulation GelbkörperamTag7 SuperovulationamTag4 OvaramTag7 Aktuelle Trends der assistierten Reproduktion - Embryotransfer beim Rind 29 Embryonengewinnung Epidurale Reinigenu.Desinfektion VORBEREITUNG Einführung des Katheters AufblasendesBallonsund AbklemmendesSchlauches Aktuelle Trends der assistierten Reproduktion - Embryotransfer beim Rind 30 SpüllösungreinͲ raus Anderes Spülsystem Auffangen der Flüssigkeit im Filter Embryofilter mit Spülflüssigkeit AbspritzendesFilters Entleeren des Filters Aktuelle Trends der assistierten Reproduktion - Embryotransfer beim Rind Embryonensuche 31 AufsaugeneinesEmbryos EmbryoeinerHochleistungskuhmit erhöhtemFettanteil Embryo Transfer: Tag-7 Rinderembryo Quelle: Leroy 2005 29 Tag7Morulae EmbryoeinerHochleistungskuh miterhöhtemFettanteil KlassifizierungderEmbryonen EmbryoeinesJungrindes 30 Aktuelle Trends der assistierten Reproduktion - Embryotransfer beim Rind 32 KlassifizierungderEmbryonen ETͲ Medien SämtlicheKulturmedienstammenaus Neuseeland(ICP) Neuseelandistgeographischisoliert NeuseelandhatsehrstrengeEinfuhrbedingungen NeuseelandistfreivonallenKrankheiten,diein derListeA derOIEaufgeführtsind 33 HandbuchderIETS, 3.Auflage1998,Kapitel6 ZonaPellucida einewichtigeBarriere EmpfehlungfürdiehygienischeAufbereitung vonInͲvivoͲproduͲ ziertenEmbryonen A, B und C: akzeptable Embryonen in Bezug auf Krankheitskontrolle D, E und F: nicht akzeptable u.a.Vorgehensweisefürdas„Waschen“der Embryonen 34 Beschriften der Paillette mit Hand ArbeitsanleitungfürdasWaschenund Trypsinbehandlung vonRinderembryonen I. 5x waschen in Emcare Holding Medium II. 2x waschen in Trypsin 30 – 45 Sekunden (Gesamteinwirkungszeit 60 – 90 Sekunden) III. 35 5x waschen in Emcare Holding Medium 36 Aktuelle Trends der assistierten Reproduktion - Embryotransfer beim Rind BeschriftendesVerschlußstickes Verschliessen der Paillette mit Stick Kristallisation(Seeding)beiͲ6Celsius 33 BefüllungderPaillette Einfriervorrichtung Flüssiger Stickstoff Aktuelle Trends der assistierten Reproduktion - Embryotransfer beim Rind 34 Überführunginfl.Stickstoff Pailletten in Hüllen verpacken Empfängervorbereiten Übertragung des Embryo • NatürlicheBrunst:keineVorbereitung notwendig,nachsiebenTageeinsetzen • Synchronisierung: • Prostaglandin2xinAbstandvon11Ͳ12Tagen • oder • SpiraleplusProstaglandin I.Untersuchung desEmpfängers,ob funktionsfähigerGelbkörpervorhandenistundMarkierung derentspechendenSeite II. FrischenEmbryo innerhalb3Ͳ4Stdübertragen III.TiefgefrorenenEmbryo schonendauftauen (5sec.inLuftund20sec.in30GradwarmenWasser auftauen) Embryo Transfer: Gelbkörperkontrolle UntersuchungdesEmpfängers
