Sanierung-Rederivation Transgene Technologie
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Auftrag an die AG Transgene Technologie (TT) am ZEMM, Zinklesweg 10, 97078 Würzburg Kontakt: 0931/201-44078; E-Mail: [email protected] Klicken Sie hier, um ein Datum einzugeben. Art des Auftrags: ☐ Hygienische Sanierung (1) ☐ Rederivation kryokonservierter Embryonen (2) ☐ Rederivation kryokonservierter Spermien durch IVF (3) Hinweise: - Die Unterbringung, Haltung und Zucht der neuen Linie, sowie Erfassung im FBI muss vorab mit dem Tierhaus ZEMM abgeklärt werden. Das Phänotypdatenblatt muss der Tierhausleitung vorliegen. Es gilt die Gebührenordnung des ZEMM (www.zemm.uni-wuerzburg.de). Die Abrechnungen erfolgen über die Verwaltungsleiterin Frau Hülya Noak. Auftraggeber (AG/Institut, Projektleiter, Adresse, Telefon, E-Mail): Klicken Sie hier, um Text einzugeben. Direkter Ansprechpartner (Name, Telefon, E-Mail): Klicken Sie hier, um Text einzugeben. Bezeichnung der Mauslinie (Offizielle Standardnomenklatur und Kurz-/Arbeits-/FBI-Bezeichnung): Klicken Sie hier, um Text einzugeben. Art der genetischen Modifikation: Klicken Sie hier, um Text einzugeben. Wählen Sie ein Element aus. Wählen Sie ein Element aus. Genetischer Hintergrund: Wählen Sie ein Element aus. Sonst.: Klicken Sie hier, um Text einzugeben. Kurze wissenschaftliche Begründung für den Import der neuen Linie unter Berücksichtigung tierschutzrechtlicher und tierethischer Aspekte: Klicken Sie hier, um Text einzugeben. Erläuterungen und weitere Angaben: Zu (1) Hygienische Sanierung: - Es werden 3 – 5 vitale Männchen zur gezielten Verpaarung benötigt. 1 - - - Im Nomalverfahren werden diese mit superovulierten wt Weibchen des angegebenen genetischen Hintergrundes verpaart, die Embryonen gewonnen und unter SPF-Bedingungen in Ammenmäuse transferiert (Embryotransfer). In begründeten Ausnahmefällen wird ein Intercross mit Weibchen des transgenen Stammes durchgeführt (zB Mehrfachmutante). Dies erfordert jedoch, dass uns Weibchen mit dem korrekten Genotyp im Alter von 28 Tagen für die Superovulation zur Verfügung stehen. Dies bedingt eine entsprechende Zucht, frühzeitige Genotypisierung, sowie eine gute zeitliche Koordination und Information der TT mit mindestens einer Woche Vorlauf, wenn die Weibchen 3 Wochen alt sind. Wir bitten um Kontaktaufnahme und Besprechung des Procedere. Nach dem Embryotransfer gelangen die Ammen in die Obhut der SPF-Tierhaltung. Dort werden die Nachkommen abgesetzt und Biopsieproben mit der Aufgabenstellung zur Genotypisierung an den Auftraggeber genommen. Es wird ein Hygienemonitoring durchgeführt. Die Sanierung ist abgeschlossen, wenn genügend Tiere für die Weiterzucht vorhanden sind und der Hygienebefund in Ordnung ist. Für die Sanierung verfügbare Mäuse (Anzahl, Geschlecht, Haltungsort, -raum, FBI-Nummer): Klicken Sie hier, um Text einzugeben. Der Auftraggeber überträgt die erforderlichen Tiere an die TT zur Durchführung der Sanierung. Er bevollmächtigt die TT, für diese Linie Arbeitsaufträge an die Tierhaltung zu erteilen. Nach Abschluss der Sanierung gehen die Tiere wieder an den Auftraggeber zurück oder werden getötet? Wählen Sie ein Element aus. Zu (2) Rederivation kryokonservierter Embryonen: - - Es wird ein Auftauprotokoll benötigt, das an das Einfrierprotokoll angepasst ist und von dem Labor zur Verfügung gestellt wird, das die Kryokonservierung durchgeführt hat. Die Embryonen werden durch die TT in LN2 zunächst zwischengelagert, um die Rederivation vorzubereiten und zeitlich einzuplanen. Es ist sinnvoll, die Embryonen direkt an die TT als Lieferadresse zu verschicken. Dies muss jedoch im Vorfeld abgesprochen sein und der Lieferzeitpunkt so festgelegt werden, dass das TT-Labor besetzt und die Ware angenommen und das sensible Material fachgerecht versorgt werden kann. Bei Lieferung aus dem Nicht-EU Ausland ist für die Zollabfertigung eine Einfuhrgenehmigung auf Grundlage der VO (EG) Nr. 142/2011 erforderlich! Die Rücksendung des Transportbehälters (Dry Shipper) geht zu Lasten des Auftraggebers. Die erfolgreiche Rederivation der Embryonen durch die TT kann nicht garantiert werden. Zu (3) Rederivation kryokonservierter Spermien durch IVF: - - - Als Auftau- und IVF-Protokoll wird Nakagata et al. verwendet (Nakagata N. Cryopreservation of mouse spermatozoa and in vitro fertilization. Methods Mol Biol;693:57-73. 2011). Falls der Versender ein anderes Protokoll vorschreibt oder empfiehlt, so ist uns dies zur Verfügung zu stellen. Für die IVF werden nach Möglichkeit superovulierte wt Weibchen des Hintergrundstammes verwendet, der oben genannt ist, um die Cumulusmassen/Metaphase II-Oozyten zu präparieren Die Spermien werden durch die TT in LN2 zunächst zwischengelagert, um die IVF vorzubereiten und zeitlich einzuplanen. 2 - - - Es ist sinnvoll, die Spermien direkt an die TT als Lieferadresse zu verschicken. Dies muss jedoch im Vorfeld abgesprochen sein und der Lieferzeitpunkt so festgelegt werden, dass das TT-Labor besetzt und die Ware angenommen und das sensible Material fachgerecht versorgt werden kann. Es gibt Hinweise, dass der Transport kryokonservierter Spermien auf Trockeneis möglich ist. Dies wäre einfacher und deutlich billiger als der Versand im Dry-Shipper. Das Verfahren ist jedoch noch nicht validiert und allgemein erprobt; das Risiko trägt der Auftraggeber. Bei Lieferung aus dem Nicht-EU Ausland ist für die Zollabfertigung eine Einfuhrgenehmigung auf Grundlage der VO (EG) Nr. 142/2011 erforderlich! Die Rücksendung des Transportbehälters (Dry Shipper) geht zu Lasten des Auftraggebers. Die erfolgreiche Rederivation der Spermien durch die TT kann nicht garantiert werden. 3
