Keimtypisierung mittels MALDI-TOF-MS

Mikrobiologische Diagnostik
Keimtypisierung mittels MALDI-TOF-MS
Der Quantensprung in der mikrobiologischen Diagnostik. Profitieren sie ab sofort von
dieser Spezialdiagnostik im labor -zentral.ch.
Vor kurzer Zeit hielt eine physikalische Analysenmethode Einzug in die mikrobiologische Diagnostik –
schnell, präzis und für unsere Begriffe sehr detailliert: MALDI-TOF-MS
Was bisher geschah
Die klassische, mikrobiologische Diagnostik erfolgt durch Anzüchtung von Erregern auf Kulturmedien.
Identifiziert werden die Bakterien oder Pilze später entsprechend den spezifischen Wachstumsbedingungen und der Kolonien-Morphologie. Zur Differenzierung werden die Kulturen auf
Objektträger ausgestrichen, gefärbt (Gram, Ziehl-Neelsen, Stamp, ..) und mikroskopiert. Oft werden
zusätzlich biochemische Reihen angesetzt, um die Bakterien entsprechend ihrem metabolischen
Profil zu differenzieren. Auch serologische Tests können hinzugezogen werden, um die Diagnostik
abzurunden. Ein zusätzliches Instrument bietet die molekulare Sequenzierung. Diese PCR-basierte
Methode ist relativ teuer und arbeitsintensiv, spezialisierten Labors vorbehalten und deshalb in der
Veterinärmedizin nur sehr selten praktiziert.
Eine physikalische Methode
MALDI-TOF-MS steht für matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry
Dieses massenspektrometrische Verfahren hat die mikrobiologische Diagnostik in der Humanmedizin
revolutioniert und hält nun auch in der Veterinärmedizin Einzug. Erreger (Bakterien und Pilze)
werden mit ungekannter Präzision sehr rasch identifiziert..
Und so funktioniert‘s
Basis ist die gewachsene, mikrobiologische Kulturen, dann folgt die gesamte Differenzierung und
Typisierung in einem speziellen Gerät: Eine kleine Menge einer Kolonie wird auf eine Analysenplatte
aufgebracht und mit einer Matrix-Lösung beschickt. Die „Targetplatte“ wird in das MALDI TOF MS
Gerät eingeführt, wo sie im Hochvakuum mit einem fokussierten Laserstrahl beschossen wird,
wodurch die eingebetteten Mikroorganismen explosionsartig verdampfen. Dabei kommt es zu einer
Ionisierung der vorliegenden Moleküle, welche in einem starken elektrischen Feld beschleunigt und
auf einen Detektor gelenkt werden. Die Flugzeit (time-of-flight) der Analyten wird präzise gemessen
und bestimmt von der Masse als auch vom Ionisierungsgrad der Proteine. Untersucht werden in
erster Linie positiv geladene, ribosomale Proteine. Ihre Spektren sind für einzelne Bakterien- oder
Pilzspezies charakteristisch und ergeben einen molekularen Fingerabdruck. Eine ausgefeilte Software
kann aus dem Spektrum eine sichere Keimzuordnung machen.
Was bedeutet das für Sie?
Speziesspezifische Keimtypisierungen haben bis anhin viel Zeit in Anspruch genommen und kamen
auch aus Kostengründen oft zu kurz. Dies wird sich nun ändern. Keime, die nicht schon mit
konventionellen Methoden sicher differenziert werden können, gehen ab sofort in die MALDI-TOF-
MS Analyse. Wir schicken die entsprechenden Kulturen per Kurier an das „labormedizinische
Zentrum Dr Risch“, wo das kompetente Team um PD Dr. Bodmer langjährige Erfahrungen mit dieser
Spezialanalytik hat. Nach ein bis zwei Tagen erhalten Sie von uns das entsprechende Resultat. Durch
die höchst präzise Methode können Erreger identifiziert werden, die nicht jedem geläufig sind. Wir
werden Sie bei der Interpretation gerne beratend unterstützen. Die Untersuchungskosten liegen bei
Fr. 22.- und damit im Rahmen der bisherigen Keimtypisierung.
Bei Untersuchungen von Mastitiserregern wird die MALDI TOF-MS Analyse aus Kostengründen nicht
automatisch vorgenommen. Wir werden Sie aber darauf hinweisen, wo es im Einzelfall Sinn macht.
Die Analyse kann dann nachverlangt werden.